程颖：循环细胞在小细胞肺癌临床研究之中的进展

反向线粒体( Circulating tumor cells，CTCs)作为一种可替代原发的“液体活检辨认出地”，已在移出特质乳胰脏、癌和结直肠癌里用于HRS赞誉。小线粒体癌症(Small celllung cancer，SCLC)有组织辨认出地举例来说极低，且考虑到有效的监控入院移出和预见HRS的生物圣万。近些年量化者CTCs在SCLC里的流行病学广为应用来进行了探索特质量化，辨认出CTCs对SCLC的病人、仍须，监控入院、移出，审核、HRS以及确立形体用药方案等有着不可忽视涵义，本文就CTCs在SCLC流行病学广为应用里的量化成效应研究报告。

一、SCLC高滴血压CTCs的验证方律

CTCs的验证方律主要有流式线粒体验证电子技术( fluocytometry，FCM)、遗传物质一聚合酶链催化(reverse-transcriptionPCR，RT-PCR)、CellSearch管理系统、CTC芯片(CTC-chip)电子技术和薄膜滤过分开线粒体电子技术(isolation by size of epithelial tumor cells．ISET)等，其里CellSearch管理系统因其半自动化的操控游戏平台，高的特异特质、敏感特质和可重复特质，踏入最常广为应用的CTCs验证方律。

更早在2004年，Allard等率先广为应用CelISearch律验证了99举例癌症（未罗列SCLC举例数）高滴血压的CTCs，随后Nagrath等采用CTC-chip律验证了55举例癌症高滴血压外周滴血C TCs。2009年以后的量化多采用CeIISearch律验证SCI．C高滴血压外周滴血CTCs，然而该方律由于对考虑到增生特点的线粒体但会出现漏检有可能，且与免疫磁珠及抗体结合的CTCs无律行某些后续的验证，流行病学广为应用受到之外。

近些年，随着固态生物技术的的发展，靶向CTCs颗粒圣万的特异特质识别分f修饰的固态材料结合微流控电子技术的CTCs验证游戏平台的量化受到广为关注，2013年，《自然环境》（Nature）时尚杂志将CTCs固态验证选入最具创新特质和转化成潜力的病人新方律，更进一步大放异彩。但就目前来看，除此以外的CTCs验证方律各有利弊，未有量化证实哪种方律对SCLC的CTCs验证来得有优势。着眼今后，亟必需研发特异特质、敏感特质来得高的CTCs验证电子技术，为SCLC的基础和流行病学造成了有所突破。

二、CTCs在SCLC流行病学广为应用里的量化大环境

（一）CTCs枚举与SCLC的病人、仍须

近些年多项量化推测CTCs枚举程度与SCLC的病人、仍须有密切关系0 2009年Tanaka等广为应用CeIISearch律验证了1 50举例7.5ml外周滴血CTCs，其里癌症1 25举例、非恶特质25举例，癌症高滴血压包括116举例非小线粒体癌症(non-small cell lung cancer，NSCLC)和9举例SCLC。

量化得出结论SCLC高滴血压CTCs阳特质率为66.70-/0（6举例／9举例），微小少于NSCLC高滴血压的CTCs阳特质率(胰脏25.9%，鳞癌40.9%；胰脏对比SCLC，P

同年，Hou等广为应用CeIISearch律验证了50举例初治的SCLC高滴血压外周滴血CTCs，包括20举例之外期SCLC (limited disease，LD-SCLC)高滴血压和30举例广为期SCLC(extensive disease，ED-SCLC)高滴血压，孔径期ED-SCLC及LD-SCLC高滴血压的里位CTCs枚举分列237和2个/7.5ml滴血，7举例未检出CTCs的高滴血压仅为LD-SCLC，证明CTCs枚举程度与SCLC仍须就其。

相似的结论在2012年被日本人史学家Naito等证实，量化者在51举例SCLC高滴血压里立用CeIISearch律验证孔径期CTCs程度，得出结论ED-SCLC,高滴血压的里位CTCs枚举为9.5个f 7.5ml滴血，而LD-SCLC仅为1个／7.51111滴血，进一步证明ED-SCLC高滴血压的CTCs程度少于LD-SCLC高滴血压。

（二）CTCs审核SCLC的及HRS

CTCs是不是可作为审核SCLC和HRS的有救指f,叉量化者们一直在探讨的弊端。Houi等在2009年通过CellSearch律验证了50举例SCLC高滴血压(LD-SCLC20举例，ED-SCLC30举例)的CTCs，辨认出CTCs>300个/7.5ml滴血的高滴血压及CTCs

孔径期CTCs>=50和

在该量化里SCLC高滴血压的HRS不属于绝对值设定8个/7.5ml滴血，以此将高滴血压分为CTCs>=8及

Hiltermann等在2012年同样广为应用CellSearch律验证59举例SCLC高滴血压在孔径期、1长周期肌肉注射后及4长周期肌肉注射结束后外固滴血CTCs程度，其里ED-SCLC高滴血压38举例，LD-SCLC高滴血压2 1举例c孔径期有43举例高滴血压(730-/o)CTCs≥2个/7.5ml滴血，CTCs>215个/7.5ml滴血和CTCs

经过1长周期肌肉注射后高滴血压CTCs程度微小降低，且1长周期肌肉注射后CTCs

量化者推测CTCs程度是SCLCHRS的实质上影响表征，其里1长周期肌肉注射后CTCs程度是SCLC和HRS最强的预见表征。

2013年ASCO发表的ECOG1508量化里，量化者试着在155举例ED-SCLC里投身靶向用药，并对其里123举例高滴血压孔径期CTCs来进行验证，得出结论靶向用药未能顺延ED-SCLC高滴血压的PFS和OS，但辨认出孔径期CTCs≤l00和CTCs>100个／7.5ml滴血的mPFS分列4.4和4.3个同年（P=0.07），OS分列10.7和7.2个同年(P=0.01)。量化者忽视虽然靶向用药不用能提高ED-SCLC高滴血压的PFS和OS，但却辨认出了CTCs有可能是SCLC高滴血压的HRS圣万。

都只，Igawa等试着广为应用OBP-401次测试验证SCLC高滴血压外周滴血CTCso广为应用OBP-401次测试验证乳胰脏和肺炎高滴血压CTCs的就其量化已有前期新闻报道。量化纳入30举例韧治的SCLC高滴血压，29举例高滴血压(96%)外周滴血CTCs阳特质。在孔径期，21举例高滴血压CTCs

（三）CTCs监控SCLC的入院和移出

除此以外的量化表明通过验证CTCs的出现来监控SCLC的入院和移出有着不可忽视的流行病学涵义o Tanaka等量化辨认出CTCs程度‘j 125举例癌症高滴血压（包括9举例SCLC高滴血压）成效微小就其，特别是与高处移出密切（AUC-ROC 0,873 p

基于这些信息，写作者忽视CTCs可作为监控癌症高处移出的生物标记物。Natio等量化辨认出SCLC在孔径期、用药结束后及入院后CTCs的阳特质率分列68.6%、26.5%和67.6，预设SCLC入院后外周学CTCs程度升高，再次发生高处移出脑部的可有为0、1和>=2的高滴血压其里位CTCs枚举分列2.0、7.5和21个/7.5ml滴血,预设CTCs程度与高处移出脑部的可有有关，高处移出越多，CTCs枚举越高（p

三、CTCs在SCLC流行病学广为应用里的探索方向

入院和移出是导致高滴血压用药失败和死亡的主要诱因，马上辨认出的入院和移出并采敢积极有效的用药措施可显著提高高滴血压生存率。然而，由于SCLC考虑到能够监控入院和移出的生物圣万，且常规医学影像检查无律辨认出微移出灶及也就是说残留病灶，导致再次发生入院和移出的SCLC高滴血压只能马上不能接受病人和用药。

流行病学里部分LD-SCLC的高滴血压HRS不同较大，预设有些之外期的高滴血压在病人时有可能已再次发生了医学影像只能辨认出的微移出而踏入潜在的广为期高滴血压。通过验证外周滴血CTCs的出现及可有叠加从而对SCLC高滴血压体内状态来进行实时、动态地监控和赞誉，马上辨认出的入院、移出，将有助于流行病学药剂师对用药意图的把握和用药方式而的选择，但究竟CTCs的可有或叠加绝对值为多少时能够精确反映SCLC的入院或移出尚不明确，须要来得多的循证医学确实应支持。

CTCs在审核SCLC高滴血压用药之外的广为应用尚正处于探索收尾，用药过程里CTCs可有的叠加与SCLC高滴血压肌肉注射的就其特质及其与SCLC高滴血压放疗意图的选择等弊端在今后必需大量的流行病学。近5年，对CTCs是不是可作为SCLC高滴血压HRS指标的量化逐渐有所增加，但SCLC最佳的HRSCTCs不属于绝对值尚无众说纷纭，争议颇多。

其里3项来自Hou、Naito、Hiltermann的量化将SCLC的HRSCTCs畀乘积分别设定为50、8和2个／7.5ml滴血，不同很大，这有可能与量化采用的统计学方律不尽相同以及入组样本量较少有关。近期博洛尼亚史学家Normanno等论点将ED-SCLC和LD-SCLC高滴血压分开量化，对孔径期、l长周期肌肉注射后CTCs以及用药前后CTCs的叠加绝对值分别设定HRS不属于绝对值，为今后的量化给予了新的思路。笔者所在的科研团队也正致力于而今SCLC高滴血压HRS最佳CTCs不属于绝对值的量化，结果令人期望。

的形体用药是用药模式的的发展方向。SCLC高滴血压对肌肉注射药品的催化存有微小的个体不同，其主要诱因有可能与复杂的异质特质、基因表达不同及多态特质有关。所以，逐步明晰SCLC的原核生物学特点对实现真正涵义上的SCLC形体用药尤为不可忽视。近期而今史学家王洁等量化人员通过广为应用单线粒体基因脱氧核糖核酸行为对高滴血压单个CTC来进行仅有原核生物、外显子原核生物脱氧核糖核酸。

在此项量化里，谢晓亮研究员所制造的多重固化和环化反向的逐次电子技术(MAIBAC)，事与愿违实现了对高滴血压外周滴血单个CTC的仅有原核生物逐次和厚度脱氧核糖核酸，在单个线粒体程度探测仅有原核生物基因拷贝数人体内(CNVs)和单核酸人体内(SNVs)o单线粒体程度CTCs原核生物脱氧核糖核酸电子技术可马上给予如耐药性遗传性等形体用药所必需的不可忽视信息，同时也为今后SCLC靶向药品的研发给予电子技术支持。

SCLC有组织辨认出地难以获取，限制了后续各项常规量化的开展，而借助CTCs构建的SCLC反向线粒体移植糙( CTC-derived explants，CDXs)假设，月内妥善解决这一棘手难题。都只，Hodgkinson等试着将6举例ED-SCLC高滴血压lOml外周滴血里的CTCs提取后注射到免疫大鼠静脉，结果在4只大鼠身上构成了CDXs，证明SCLC高滴血压的CTCs有着致糙特质。

同时广为应用CelISearch律验证这6举例SCLC高滴血压的CTCs，得出结论事与愿违构成CDXs的4举例高滴血压的CTCs枚举仅>400个／7.5ml滴血，而另外2举例未构成CDXs的高滴血压其CTCs枚举分列222和20个／7.5ml滴血，预设SCLC的CTCs致糙特质与外周滴血CTCs教量有关。进一步量化辨认出相较于肌肉注射敏感特质SCLC，肌肉注射耐药性特质SCLC高滴血压的CDXs倍增时间细、潮湿来得迅速。对3举例CDXs给予顺铂和依托泊苷肌肉注射药品，其敏感特质顺序为CDX3>CDX2>CDX4，相应高滴血压的OS分列9.7.3.5.0.9个同年，预设对CDXs来进行排泄药敏次测试可以间接催化高滴血压生存时间。

该量化推测部分SCLC的外周滴血CTCs有着干线粒体特特质，可来进行排泄培植、构成与原发高度相似的CDXs，为SCLC高滴血压的排泄药敏次测试、耐药性前提量化等一系列常规量化给予了可用的有组织，妥善解决了SCLC高滴血压辨认出地举例来说极低的弊端。

结论

从现行的量化可以看出，虽然CTCs在SCLC里的流行病学广为应用仍正处于探索收尾，但无疑辽阔。目前，诸多转化成特质量化正在来进行里，相信随着量化的不断深入，CTCs月内踏入SCLC的有所争取时间，期望CTCs在SCLC的领域里为我们造成了惊喜。

编辑： 霜